Vörulýsing

Hvert er ferlið við að vinna húðkollagen úr fiski?

Formeðferð: Þetta skref felur í sér að fjarlægja óhreinindi eins og fitu og heteróprótein úr fiskroði. Til dæmis er vatnsfrír eter notaður sem hvarfefni fyrir fituhreinsun og meðhöndlað í 16 klukkustundir í hlutfalli fóðurs og vökva sem er 1:8 0 (g/mL); eða 0,6 mól-L^-1 Na2CO3 lausn er notuð til að fjarlægja heteróprótein með því að meðhöndla húðina tvisvar við 25 gráður í 6 klukkustundir í hvert sinn.

ÚTTRUN: Samkvæmt mismunandi rannsóknum eru ýmsar aðferðir til að vinna út kollagen, þar á meðal basískar, ensímfræðilegar og ómskoðunarstuddar ensímaðferðir. Til dæmis, ákjósanlegur skilyrði fyrir basískt útdráttur steinbítshúð kollagen fyrir efni-vökva hlutfall 1:10, bæta 1,6% af Ca (OH) 2, 70 gráður í 9 klukkustundir; ensím útdráttur gullna pomfret fisk húð kollagen fyrir ákjósanlegur skilyrði fyrir að bæta við ensím magn af 1,5%, vökva-fóðrun hlutfall 23:1 mL / g, ensím tími 27,5 klukkustundir; ensímútdráttur með úthljóðsstuðli úr kollageni úr makrílfiskroði fyrir bestu aðstæður fyrir útdráttur úr makrílskinnskollageni. Ákjósanleg skilyrði fyrir ensímútdrætti með makrílskinnskollageni voru 100 U/g af ensími, pH 7,5, ensímmeltunarhiti 40 gráður og úthljóðsmeðferð tími 50 mín.

Hreinsun: útdregna kollagenið þarfnast frekari hreinsunar til að fjarlægja hugsanleg óhreinindi. Til dæmis var dextran gels súluskiljun notuð til að hreinsa útdregna, salta og afmengaða kollageninu frekar.

Greining og einkenni: að lokum var útdregna og hreinsaða kollagenið greint og einkennt með ýmsum greiningaraðferðum (td SDS-PAGE rafdrætti, hringlaga tvígreiningu, massagreiningu á flugtíma osfrv.) til að staðfesta uppbyggingu þess og eiginleika. Til dæmis sýndu niðurstöður SDS-PAGE að kollagen inniheldur 1, 2 og keðjur, sem er dæmigerð tegund I kollagen; Flugtímamassagreining var notuð til að ákvarða svið sameindamassadreifingar vatnsrofsins sem fékkst og niðurstöðurnar sýndu að sameindarmassi þess var aðallega samþjappaður á bilinu 0,6 kDa til 1,8 kDa.